外泌體是包含了復(fù)雜 RNA 和蛋白質(zhì)的小膜泡,是細(xì)胞間信號傳輸?shù)妮d體。多種細(xì)胞在正常及病理狀態(tài)下均可分泌外泌體,它們廣泛存在于血液、唾液、尿液、腦脊液和乳汁等體液中,參與細(xì)胞間通訊。近年來,外泌體的研究熱度持續(xù)攀升,已成為當(dāng)前生命科學(xué)和基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)研究的一大熱點,在 2023 年國家自然科學(xué)基金獲批項目中,外泌體研究相關(guān)項目的總數(shù)近 390 個,立項的總金額突破 1.5 億元。但由于外泌體的尺寸( 30~200 nm ),常規(guī)的光學(xué)顯微鏡無法對其進(jìn)行成像分析,因此很少有技術(shù)能夠?qū)蝹€外泌體進(jìn)行物理表征和蛋白分型。
美國NanoView Biosciences 公司推出的全自動外泌體熒光檢測分析系統(tǒng) ExoView采用特殊的 SP-IRIS 成像技術(shù),只需要少量樣品即可一次完成外泌體計數(shù)、粒徑、蛋白表達(dá)、蛋白共定位、亞群分布的分析。全自動外泌體熒光檢測分析系統(tǒng) ExoView 于 2018 年被推出后,便引起了外泌體領(lǐng)域科研工作者的廣泛關(guān)注,目前在全球已近 100 多個實驗室采用該技術(shù),發(fā)表文獻(xiàn)超過 290 篇。在過去的 2023 年,使用 ExoView 發(fā)表的論文出現(xiàn)井噴性增長,短短數(shù)月已經(jīng)發(fā)表了超過 93 篇。近期,Akira Yokoi團(tuán)隊[1]利用該系統(tǒng)在卵巢癌外泌體研究領(lǐng)域取得重要進(jìn)展,成果發(fā)表于高水平期刊《Science Advances》上。
全自動外泌體熒光檢測分析系統(tǒng) ExoView 系統(tǒng)
■ 通過聚酮涂層納米線識別高級別漿液性卵巢癌分泌的特異性外泌體
早期卵巢癌是最容易治療的,但其很難被發(fā)現(xiàn)和診斷,因此開發(fā)新的診斷方法非常緊迫。癌細(xì)胞源性的外泌體 ( EV ) 具有特殊的蛋白質(zhì)特征,其作為疾病生物標(biāo)志物具有很好的前景。高級別漿液性卵巢癌 ( HGSOC ) 是上皮性卵巢癌的致命亞型。Akira Yokoi[1]等通過LC-MS/MS 分析來自細(xì)胞系或患者血清及腹水的小型 EV(sEV)和中型/大型 EV ( m/lEV ) 的 HGSOC 特異性膜蛋白,揭示了兩種 EV 亞型均具有特殊的蛋白質(zhì)組特征,其中 FRα、Claudin-3 和 TACSTD2 被鑒定為 HGSOC 特異性 sEV 蛋白。此外,研究人員為了使用簡單易用的微流體裝置分離 EV,開發(fā)了聚酮涂層納米線 ( pNW ),可以有效地從生物流體中純化 sEV。使用 pNW 分離的 sEV 的多重陣列檢測對癌癥患者具有特殊的可檢測性并可監(jiān)測其臨床狀態(tài)。總之,使用 pNW 的 HGSOC 特異性標(biāo)記物檢測方法可作為臨床檢測生物標(biāo)記物的一個具有前景的平臺。
其中,研究人員把樣本分成四組,分別是兩種癌細(xì)胞 ( CAOV3、 OVCAR3 ) 和兩種非癌細(xì)胞 ( HOSE1 和 MTK ),并利用全自動外泌體熒光檢測分析系統(tǒng) ExoView 檢測從四種細(xì)胞系分離出的外泌體。結(jié)果顯示被 CD63 抗體捕獲的 Claudin-3 陽性外泌體數(shù)量在各組之間幾乎沒有差異,而 FRα 和 TACSTD2 陽性外泌體更多存在于癌細(xì)胞組別中( CAOV3 和 OVCAR3 )( 圖1 )。另外,與其他樣品組對比,被 CD63 抗體以及 CD81 抗體捕獲的 FRα 和 TACSTD2 陽性外泌體明顯在 OVCAR3 細(xì)胞中更多( 圖1 ),熒光成像圖對這個結(jié)論進(jìn)行了佐證( 圖2 )。
圖 1 ExoView 檢測從癌細(xì)胞 ( CAOV3 和 OVCAR3 ) 以及非癌細(xì)胞 ( HOSE1 和 MTK ) 分離的外泌體的數(shù)量
圖 2 ExoView對癌細(xì)胞 ( CAOV3和 OVCAR3 ) 以及非癌細(xì)胞 ( HOSE1 和 MTK ) 分離的外泌體進(jìn)行熒光成像分析
在上述這篇文章中,科學(xué)家借助美國 NanoView Biosciences 公司研發(fā)的全自動外泌體熒光檢測分析系統(tǒng) ExoView ,直接檢測樣本中的外泌體,無需純化,操作簡單。一次結(jié)果直接輸出外泌體粒徑,絕對數(shù)目,蛋白表型,不同亞群的含量、多色熒光成像圖??傊似恼掠辛Φ刈C明 ExoView 是外泌體檢測的一大利器。
服務(wù)推出至今,短短兩年時間已經(jīng)助力多個中國客戶發(fā)表高水平文獻(xiàn)!
■ 南方醫(yī)科大學(xué)在《Chemical Engineering Journal 》發(fā)表文章
■ 南方醫(yī)科大學(xué)珠江醫(yī)院在《Bioengineering & Translational Medicine 》發(fā)表文章
■ 上海大學(xué)在《Journal of extracellular vesicles 》發(fā)表文章
■ 中國科學(xué)院深圳先進(jìn)技術(shù)研究院在《Lab on a Chip 》發(fā)表文章
■ 北京天壇醫(yī)院、國家納米科學(xué)中心、北京航空航天大學(xué)在《Advanced Science 》發(fā)表文章
■ 同濟(jì)大學(xué)附屬上海市肺科醫(yī)院、上海思路迪轉(zhuǎn)化醫(yī)學(xué)團(tuán)隊在《Journal of Nanobiotechnology 》發(fā)表文章
■ 山東千佛山醫(yī)院在《NANO LETTERS 》發(fā)表文章
■ 陜西師范大學(xué)在《Food & Function 》發(fā)表文章
■ 南京大學(xué)在《Frontiers in Cell and Developmental Biology 》發(fā)表文章
■ 中山大學(xué)在《ACS NANO 》發(fā)表文章
■ 北京理工大學(xué)在《Acta Pharmaceutica Sinica B 》發(fā)表文章
■ 中南大學(xué)湘雅二醫(yī)院在《International Journal of Nanomedicine 》發(fā)表文章
樣機(jī)體驗:
為了更好的服務(wù)中國客戶,Quantum Design 中國子公司在北京建立了專業(yè)的客戶服務(wù)中心,正式推出專業(yè)的全面外泌體表征測試服務(wù),您只需要極少量樣品即可獲得全面的外泌體表征數(shù)據(jù)!歡迎各位老師垂詢!
參考文獻(xiàn):
[1] Akira Yokoi …& Hiroaki Kajiyama. (2023) Identifying high-grade serous ovarian carcinoma– specific extracellular vesicles by polyketone-coated nanowires. SCIENCE ADVANCES, 9, eade6958.
相關(guān)產(chǎn)品:
1. 全自動外泌體熒光檢測分析系統(tǒng)
2. ExoView外泌體全面表征試劑盒